随着科技的进步,在传统的病理技术作业上高科技应用的方面越来越广泛,像脱水、染色、特染、免疫组化这几个方面各个厂家都推出了新机器来代替人工操作使得这些工作的效率和质量得到大幅度的提高,现在国内一些有实力的厂家也进入这个领域,我们科去年年底购入深圳金年会金字招牌诚信至上公司DP260型染色机用于病理技术工作里的常规HE染色,常规HE人工染色步骤多,随意性强,质量不稳定,而全自动染色机正好避免了这些问题,通过一段时间的使用,我们根据现有的工作环境和试剂情况,摸索和制定了新的染色流程和程序,并利用DP260染色机内置的灵活、实用的功能设置,使得染色质量和效率显著改善。现将我们使用的情况汇报如下:
我们使用的是金年会金字招牌诚信至上公司DP260型染色机,试剂为改良迈耶苏木素、1%醇溶性伊红、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、1%盐酸乙醇、二甲苯。
方法:常规石蜡切片
HE染色,石蜡切片厚3微米,裱帖在载玻片上,在载玻片的磨砂面正确标出组织块的编号,放入染色机配套的玻片篮中即可上机染色程序完成后自染色出口处取出切片,置入CV5030自动盖片机中,使用中性树胶封固。程序如图:
结果:石蜡切片HE染色透明性好、鲜艳、均匀胞核和胞质着色良好、对比清晰。
讨论
试剂选择;北方地区冬天气温冷,水温低,用一般染色机染色的话不易上色、颜色发灰,DP260自带的加温功能,它可以将四个站点通过水温持续加热并维持33到40度,而且水温可调。我们在苏木素的选择了迈耶苏木素,主要是由于哈瑞氏苏木素在加温的条件下会容易过氧化,出渣以致染色质量不稳定和苏木素的使用时间过短,而迈耶苏木素属于半氧化苏木素可很好地避免这些问题发生,它可以在加温的环境下长期使用而不会有沉渣出现,染色质量在相当长的时间保持稳定,返蓝我们是用流水长时间冲洗,虽然染色时间加长但好处是颜色鲜艳,不易掉色。伊红用的是醇溶性伊红,因为醇溶性伊红上色快,颜色鲜艳。
2.染色程序设定和试剂位置摆放;我们科室主要从事常规病理工作,染色机的工作就是HE染色。为了提高工作效率,我们利用DP260染色机可同时设置储存多套染色程序的功能摆放两套苏木素,并根据他们的位置和在染色过程中耗费时间较长的环节我们分别设定了两套HE染色程序在工作中同时进行,使得染色速度比只有一套程序的要大大加快。
3.试剂更换;由于采用的是浸染式染色,每天各批次间切片染色质量会呈渐近式下降,且各染色缸液体会有一定的挥发和混合,因此,必须严格执行定期更换染液试剂以确保染色质量。我们通过DP260具有的试剂质控功能,设置试剂更换提醒、预提醒和强制更换功能,。从软件上彻底解决这一问题,将滞后性更换变成预警性提醒可有效保证所有试剂均可及时更换,并可追溯性试剂更换记录以备以后查询,本科室采用的是数量和时间相结合的质控模式,在数量上如果达到三千张切片或者时间达到两周话更换一次,每天进行质控,如效果不佳则立即更换。
DP260染色机作为一个病理技术方面的新参与者。它在继承全自动染色机染色机的优点同时,又开发出符合现实需要并具有时代新气象的新功能。他的局域水温加热功能从根本上解决了北方冬天由于气温过低导致染色不良的现象,还有他的强大的软件质控功能可以大大方便技术员的试剂管理,保证病理切片通过高质量的染色获得满意的效果。
作者:周志强 主管技师 qlbl2013@163.com 18560081182
作者单位 250012 济南 齐鲁医院病理科(周志强 王妍)